Comparación de diferentes métodos para la identificación de especies del género Candida / Comparison of different methods for species identification of genus Candida

Las diferentes especies del género Candida producen una variedad de enfermedades, desde infecciones mucocutáneas leves a formas diseminadas graves. Tradicionalmente, la taxonomía de las levaduras se ha llevado a cabo en base a estudios morfológicos y fisiológicos, pero éstos dependen de las condiciones de cultivo de las cepas, por lo que se han observado diversas dificultades. Por tal motivo, recientemente, se han probado técnicas de biología molecular. El objetivo de este trabajo es correlacionar los estudios taxonómicos de las especies correspondientes a las principales patógenas: C. albicans, C. krusei, C. parapsilosis, C. tropicalis y C. glabrata, realizados por técnicas fenotípicas tradicionales, métodos comerciales y por PCR fingerprinting. Al comparar las técnicas que identifican Candida albicans, agar harina de maíz y formación de tubos germinativos, estadísticamente se observa que no existen diferencias significativas entre ambos métodos (valor de la estadística X2 = 0,5 p = 0,4795). Comparando los métodos que discriminan especies de Candida: pruebas fisiológicas, CHROMagar, API20C y PCR fingerprinting se observó que no existen diferencias significativas en las proporciones de resultados que identifican cualquier Candida entre las pruebas fisiológicas, API20C y PCR fingerprinting. La proporción de resultados definitivos es mayor a la obtenida usando el método CHROMagar (p< 0,001).

Different species of genus Candida can cause a wide range of pathologies, since mucocutaneous trivial infections to disseminated serious forms. Traditionally, taxonomy of yeast has been performed taking into account morphologic and physiologic studies, but they depend on the culture conditions of strains, what cause certain difficulties. Thus, recently, molecular biology methods have been tried. The aim of this work is to correlate taxonomic studies of most important pathogenic species -C. albicans, C. krusei, C. parapsilosis, C. tropicalis and C. glabrata- all of them performed by phenotypic traditional methods, commercial ones, and by a molecular method, PCR fingerprinting. Comparing useful methods for C. albicans identification, corn flour agar and germinative tube formation, no statistical differences between them are observed (X2 =0.5, p=0.4795). By comparison between methods to discriminate different Candida species, physiological tests, CHROMagar, API 20C and PCR fingerprinting we observed no significative differences in proportion of accurate results, in test that can identify any Candida species, such as physiological assays, API 20C and PCR fingerprinting. The proportion of unequivocal results is greater than the obtained performing the CHROMagar culture method (p< 0.001).

Determinación de aflatoxina M1 en leche / Detection of aflatoxin M1 in milk samples

La presencia de micotoxinas en productos lácteos se debe, por lo general, a la ingesta por parte del ganado lechero de alimentos contaminados con aflatoxina B1 (AFB1). La AFM1 es el principal metabolito hepático 4-hidroxilado de la AFB1 que se excreta por la leche. Es tan tóxica como la AFB1, aunque algunos autores han demostrado que no es tan mutagénica. Recientemente se han clasificado a las AFB1 y AFM1 como carcinógenos humanos de la clase 1 y 2B respectivamente y también se ha observado que la AFM1 tiene una alta actividad genotóxica. El objetivo de este trabajo es determinar por TLC (cromatografía en capa delgada) la presencia de AFM1 en 50 muestras de leche, recolectadas en los meses de otoño, tanto de origen comercial como provenientes de pequeños tambos, donde se ordeñan artesanalmente, para estimar los niveles de exposición a la AFM1 en la población. No se detectó la presencia de AFM1 en ninguna de las muestras estudiadas hasta este momento. Esto muestra que en esta época del año, donde las vacas lecheras se alimentan de pasto natural, no existe contaminación. Seguiremos estudiando muestras recolectadas en los meses de invierno para controlar que sucede cuando además reciben suplemento alimentario. La leche es el alimento básico consumido sobre todo por niños en etapa de crecimiento; por lo tanto, debe ser monitoreada de contaminantes, incluyendo AFM1, más aún en países como el nuestro donde los factores climáticos pueden favorecer la incidencia de la misma. En nuestro país hay muy escasos datos de incidencia de AFM1 en la leche fluida, leche en polvo y en otros derivados lácteos. La dificultad para realizar estudios toxicológicos en humanos con la ingesta de AFM1 y la dificultad para la detoxificación de micotoxinas de las dietas hacen de los programas de monitoreo la principal estrategia para disminuir el riesgo de exposición a estas micotoxinas, por eso creemos que más estudios deberían efectuarse para intensificar los conocimientos acerca de toda nuestra producción lechera